動(dòng)態(tài)顯色法鱟試劑是湖州申科生物針對(duì)生產(chǎn)過程監(jiān)控開發(fā)的內(nèi)毒素檢測工具，兼具準(zhǔn)確性和便利性。該試劑靈敏度達(dá) 0.005-5EU/mL，標(biāo)準(zhǔn)曲線 R?≥0.990，可準(zhǔn)確定量內(nèi)毒素濃度，滿足生物制品中間品和成品的放行需求。成套包裝設(shè)計(jì)包含內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品、檢查用水、主試劑復(fù)溶液、主反應(yīng)試劑、96 孔板及封口膜，無需額外采購輔料，開箱即可使用，減少耗材浪費(fèi)。穩(wěn)定性上，批次間 CV 值≤15%，優(yōu)于行業(yè) 20% 的平均水平，確保長期檢測數(shù)據(jù)的一致性。配套抗增液可有效應(yīng)對(duì)蛋白質(zhì)、多糖等基質(zhì)干擾，加標(biāo)回收率穩(wěn)定在 80%-120%。操作上適配主流酶標(biāo)儀，支持 405nm 動(dòng)態(tài)讀數(shù)，數(shù)據(jù)可自動(dòng)記錄追溯，符合 GMP 數(shù)據(jù)完整性要求。 重組級(jí)聯(lián)試劑（rCR）抗干擾能力強(qiáng)于重組 C 因子（rFC），適配高蛋白、疫苗等復(fù)雜樣本檢測。江蘇細(xì)菌內(nèi)毒素檢測技術(shù)升級(jí)

樣品中存在的非特異性鱟反應(yīng)啟動(dòng)物，會(huì)繞過內(nèi)毒素直接觸發(fā)鱟試劑反應(yīng)，導(dǎo)致內(nèi)毒素檢測出現(xiàn)假陽性，需針對(duì)性消除干擾。常見的非特異性啟動(dòng)物包括 1,3-β-D 葡聚糖和含絲氨酸蛋白酶的生物制品（如胰酶）：1,3-β-D 葡聚糖會(huì)啟動(dòng)鱟試劑的 G 因子旁路，不依賴內(nèi)毒素即可引發(fā)凝膠形成或光度變化；胰酶等絲氨酸蛋白酶類物質(zhì)，其作用機(jī)制與內(nèi)毒素觸發(fā)鱟試劑的過程相似，會(huì)模擬內(nèi)毒素信號(hào)導(dǎo)致誤判。針對(duì)這類干擾，若樣品含 1,3-β-D 葡聚糖，可使用試劑盒配套的抗增液，通過抑制 G 因子活性阻斷旁路啟動(dòng)；若樣品為胰酶等生物制品，可通過加熱處理（如 80℃加熱 10 分鐘）滅活絲氨酸蛋白酶，避免其模擬內(nèi)毒素反應(yīng)。這些處理措施能有效排除非特異性信號(hào)，確保內(nèi)毒素檢測只針對(duì)目標(biāo)內(nèi)毒素產(chǎn)生響應(yīng)，提升結(jié)果準(zhǔn)確性。 上海**器械內(nèi)毒素檢測動(dòng)態(tài)顯色法鱟試劑進(jìn)行重組級(jí)聯(lián)試劑時(shí)，不同酶標(biāo)儀檢測樣本 Onset time 有差異，因信號(hào)采集方式和靈敏度不同。

如何準(zhǔn)備樣品進(jìn)行內(nèi)毒素檢測呢？測試前，需要根據(jù)樣品實(shí)際情況進(jìn)行樣本前處理。大多數(shù)樣品只需要稀釋，使用內(nèi)毒素檢測試劑盒進(jìn)行測試即可。如果樣品有蛋白酶干擾并導(dǎo)致假陽性結(jié)果，建議對(duì)樣品稀釋并70°C加熱5-15分鐘進(jìn)行熱滅活處理。如需要，可以對(duì)滅活樣品進(jìn)行進(jìn)一步稀釋后檢測。如果樣品可能含有受β-葡聚糖，建議使用抗增液。β-葡聚糖可能來自酵母和纖維素材料。如果樣品中因含有內(nèi)毒素結(jié)合物而存在抑制，可以嘗試使用分散劑。

隨著動(dòng)物保護(hù)理念和法規(guī)要求升級(jí)，重組因子C法（rFC法）作為 LAL 法的替代技術(shù)逐漸普及。重組 C 因子是以基因重組的方式表達(dá)的 LAL 試劑中的 C 因子，C 因子被內(nèi)毒素活化后切割熒光底物產(chǎn)生游離熒光基團(tuán)，通過檢測熒光信號(hào)可以反應(yīng)活化后的蛋白酶活性，并由此可以推算出內(nèi)毒素的含量。與傳統(tǒng) LAL 法相比，rFC 法無需依賴鱟血資源，避免了天然 LAL 試劑批間差異大、易受 β- 葡聚糖干擾等問題，且反應(yīng)特異性更強(qiáng)。目前，《美國藥典》、《歐洲藥典》等法規(guī)已收錄 rFC 法，歐盟更推薦其用于疫苗等高風(fēng)險(xiǎn)產(chǎn)品檢測，在保證檢測準(zhǔn)確性的同時(shí)，符合動(dòng)物福利和可持續(xù)發(fā)展要求。 內(nèi)毒素檢測凝膠法實(shí)驗(yàn)需西林瓶等耗材，確保無外源內(nèi)毒素污染檢測。

**器械（如輸液器、注射器、植入式設(shè)備）若攜帶內(nèi)毒素，可能通過血液、組織接觸引發(fā)異常反應(yīng)或炎癥反應(yīng)。其檢測需遵循 “模擬臨床使用” 原則：采用浸提液（如 0.9% 氯化鈉溶液或注射用水）在 37℃±1℃下浸提器械表面內(nèi)毒素，再通過 LAL 或 rFC 法檢測浸提液。不同器械的內(nèi)毒素限值差異明顯：一次性輸液器需≤0.5 EU/device，植入式心臟瓣膜則要求更嚴(yán)格（≤0.06 EU/device）。檢測時(shí)需注意器械材質(zhì)對(duì)浸提效率的影響，如塑料類器械可能吸附內(nèi)毒素，需優(yōu)化浸提時(shí)間（通常≥1 小時(shí)）或采用超聲輔助提取，確保殘留內(nèi)毒素被充分檢出。 內(nèi)毒素檢測方法多樣，影響因素及實(shí)驗(yàn)干擾較多，包括實(shí)驗(yàn)操作步驟、樣品處理等方面。上海**器械內(nèi)毒素檢測動(dòng)態(tài)顯色法鱟試劑

重組級(jí)聯(lián)試劑（rCR）無動(dòng)物源，不含 G 因子，可避免 β- 葡聚糖致內(nèi)毒素檢測假陽性。江蘇細(xì)菌內(nèi)毒素檢測技術(shù)升級(jí)

低內(nèi)毒素回收（LER）的主要形成機(jī)制之一是螯合劑與非離子表面活性劑的協(xié)同作用，直接影響內(nèi)毒素檢測結(jié)果。**步，樣品中的螯合劑（如檸檬酸鹽）會(huì)去除二價(jià)陽離子（Mg??、Ca??），削弱 LPS 聚集體的鹽橋結(jié)構(gòu)，降低其剛性；第二步，表面活性劑（如吐溫 20）嵌入 LPS 分子，形成混合聚集體（膠體、層狀結(jié)構(gòu)），改變 LPS 的超分子形態(tài)。LPS 從 “可檢測態(tài)” 轉(zhuǎn)為 “不可檢測態(tài)”，導(dǎo)致鱟試劑中的 C 因子無法與內(nèi)毒素結(jié)合，內(nèi)毒素檢測出現(xiàn)假陰性。這種變化是時(shí)間依賴的，與稀釋度無關(guān)，給常規(guī)內(nèi)毒素檢測帶來獨(dú)特挑戰(zhàn)。 江蘇細(xì)菌內(nèi)毒素檢測技術(shù)升級(jí)